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基因编辑其实不难 ——来自U Michigan和Cornell华人学者的新研究

作者:admin信息来源:达科为日期:2018年08月09日打印字体:  
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很多小伙伴应该跃跃欲试,想用这个结合CRISPR/Cas9 RNP和同源重组的方法来高效进行基因编辑吧?但是根据新闻介绍,作者花了一年多时间,进行了1000多个电转样品的测试才掌握了电转的合适条件。这又让人感觉这个方法难度不小,即使在论文指引下,想要在自己实验室消化吸收怎么也得花不少力气吧?

昨天另一篇来自密歇根大学和康奈尔大学的论文展示了一种新的电转方法,该方法结合同源重组可以大大提高基因编辑的效率。

文章的共同通讯作者为密西根大学的徐捷教授和康奈尔大学的夏晓峰教授。这篇文章和Marson组文章的共同点是都使用电转Cas9RNP的方法在一些之前认为很难编辑的细胞上取得了很高的同源重组效率。Marson实验室的研究更加深入,在免疫治疗上几个重要的基因位点做了基因编辑的研究,不仅对于CAR-T可能有很大帮助,对于TCR-T的制备可能也有重要意义。


徐、夏两个实验室主要从事干细胞和转基因动物模型研究,因此对于基因编辑主要着眼在方法学上,力争使基因编辑高效并且简单,可以普遍性地应用于各种细胞上。相比于Marson组的文章,徐、夏这篇文章还报道了在除了T细胞之外的多种细胞包括iPSC干细胞,MSC间充质干细胞,以及一些细胞系上取得的良好效果。

对比文章可以看到,Marson实验室的电转条件摸索花了很多时间,他们用的电转系统是Amaxa Nucleofector。这篇Scientific Reports的文章则使用的是一种新的电转系统——Celetrix电转系统,在和Nucleofector的直接对比试验中表现出更好的性能,包括细胞成活率和转染效率。值得一提的是,Celetrix电转系统由华人科学家陈剑发明,他也是该文的作者之一。


看过这两篇文章,小伙伴们是不是也感觉使用高效的电转系统,在多种细胞包括和免疫治疗直接相关的T细胞中的基因编辑并不是一件困难的事情了呢?小伙伴们,大胆地去做自己的设计吧!

Celetrix电转系统被称之为第三代电转技术,采用独特的加压电击管替代传统U型电击杯的设计,奠定了它具有更高电转效率和更高细胞存活率的基础原理的优越性,另外为轻松实现大容量细胞电转成为现实。

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